Yumurta sarısının rengi, yumurtanın besin değeri ve tazeliği ile ilgili bir gösterge olarak kabul edilmektedir. Yumurta sarılarında daha koyu olan sarı-turuncu tonlarındaki yumurtalar en çok talep görenlerdir.
Bu nedenle, bazı yumurta üreticilerinin tavuklarını çeşitli sentetik boyalar içeren yemlerle besleyerek istenen tonda yumurta üretimi gerçekleştirmeye çalıştıkları tespit edilmiştir (Şekil 1). Bu durum, yasaklı boyar maddelerin yumurtadaki varlığı araştırılarak ortaya çıkarılabilmektedir.
Bu çalışmada, yumurta sarısında belirli yasaklı boyaların miktar tayini gerçekleştirilmiştir. Yüksek hassasiyetteki miktar tayini için Shimadzu LCMS-8040 üçlü kuadrupol kütle spektrometre kullanılmıştır (Şekil 2).
LCMS-8040’ın yüksek tarama hızı sayesinde dört sudan boyası ile p-red boyanın eş zamanlı analizini mümkün kılmaktadır. Tüm bu boyalar, yumurta matrisinin varlığına rağmen, yüksek seçicilikle ve iyi tekrarlanabilirlikle düşük ppb seviyelerinde tespit edilmiştir.
Sudan ve p-red boyaları sudan I, II, III, IV vb. gruplarda sentetik endüstriyel boya içermektedir. Uluslararası Kanser Araştırma Ajansı 1987 yılında sudan I, II, III ve IV boyalarının güvenilirliğini araştırmış ve söz konusu boyaların insanlar açısından kanserojen grubunda sınıflandırılmasının mümkün olmadığı sonucuna ulaşmıştır.
Sudan boyalarının deney hayvanlarında kansere neden olabileceğine ve genlerde hasara yol açabileceğine dair bazı kanıtlar olsa da halen bu boyaların insanlarda kansere yol açabileceğine dair yeterli kanıt bulunmamaktadır. Uygulamada çalışılan dört sudan boyası ve para red boya Şekil 3’te gösterilmektedir.
Analiz Metodu
Matriks Karşılaştırmalı Kalibrasyon Eğrisi Numune hazırlama aşamasında ekstraksiyon için Qu- EChERS kit kullanılmıştır. Toplanan süpernatant C-18 SPE kartuşundan geçirilmiş ve asetonitril ile elüe edilmiştir. Bu elüent 1 ppb – 100 ppb aralığında matriks karşılaştırılmalı dilüsyonlar oluşturulmak için kullanılmıştır.
LC/MS/MS Analizi
LC/MS/MS koşulları Tablo 1’de verilmektedir. LCMS-8040, ultra hızlı polarite geçişi ve ultra hızlı MRM ve yüksek hassasiyetli ölçümleri ile gıda güvenliği analizleri için uygun bir cihazdır. Bu özellikler farklı iyonlaşma eğilimleri olan çoklu bileşiklerin tek enjeksiyonda ve hassasiyet kaybı olmaksızın tespitine olanak tanımaktadır.
Sonuçlar
Sudan ve para red boyalarının analizi hem sulu matrikste hem de yumurta sarısı matriksinde gerçekleştirilmiştir. MRM LabSolutions yazılımına ait otomatik MRM optimizasyonu özelliği kullanılarak optimize edilmiştir.
Analiz ayrıca, interferanslar açısından blank (kör) ile kontrol edilmiştir. Metod optimizasyonu sayesinde background interferanslar minimize edilmiştir.
Şekil 4, yumurta sarısında 5 boyanın eş zamanlı analizinin sonucunu göstermektedir. Kantitatif sonuçlara Tablo 4’te yer verilmiştir. 5 boyanın her biri için hem sulu hem de yumurta sarısı matrikslerinde, 1 ppb’lik LOQ değeri elde edilmiştir.
• Yumurta sarısında dört sudan boyası ve p-red boyanın yüksek hassasiyetli eş zamanlı analizi için bir metod geliştirilmiştir.
• 1 ppb’lik LOQ değeri, 5 boyanın her birinde, matriks karşılaştırmalı kalibrasyon standartları kullanılarak, 0.99’un üzerinde
doğruluk ve %90-110 arasında hassasiyetle elde edilmiştir.
• Background interferansı minimize etmek, dolayısıyla hassasiyeti artırmak için bir analitik metot geliştirilmiştir.
Referanslar
[1] Rashi Kochhar, Shailendra Rane, Shailesh Damale, Deepti Bhandarkar, Shruti Raju, Ajit Datar,
Pratap Rasam and Jitendra Kelkar, Shimadzu Analytical (India) Pvt. Ltd., ASMS 2015 Poster TP 334
Murat Yayla
Yüksek Kimyager
MS Grup Müdürü
Ant Teknik Cihazlar
